vetpressАграрная наукаAgrarian science0869-81552686-701XРедакция журнала "Аграрная наука"10.32634/0869-8155-2021-344-1-52-56vetpress-1449Research ArticleРАЗВЕДЕНИЕ, СЕЛЕКЦИЯ, ГЕНЕТИКАBREEDING, GENETICSАнализ параметров, характеризующих аргирофильные зоны в интактных лимфцитах у домашних овец (Оvis aries l., 1758) и их гибридов с архаром (Оvis ammon l., 1758)Analysis of parameters characterizing argyrophilic zones in intact lymphocytes of domestic sheep (Ovis aries L., 1758) and their hybrids with argali (Ovis ammon L., 1758)https://orcid.org/0000-0003-2266-1275КленовицкийП. М.KlenovitskyP. M.

Павел Михайлович Кленовицкий, доктор биологических наук, профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной инженерии

Московская область, г. о. Подольск

Pavel M. Klenovitsky, Dr. Sci. (Biology), Professor, Chief Staff Scientist of the Laboratory of Cell Engineering

Podolsk Municipal District, Moscow Region

klenpm@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5386-7263ИолчиевБ. С.IolchievB. S.

Байлар Садрддинович Иолчиев, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной инженерии

Московская область, г. о. Подольск

Baylar S. Iolchiev, Dr. Sci. (Biology), Leading Staff Scientist of the Laboratory of Cell Engineering

Podolsk Municipal District, Moscow Region

baylar2@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2865-5960ВетохА. Н.VetokhA. N.

Анастасия Николаевна Ветох, научный сотрудник лаборатории функциональной и эволюционной геномики животных

Московская область, г. о. Подольск

Anastasia N. Vetokh, Scientist of the Laboratory of Functional and Evolutionary Animal Genomics

Podolsk Municipal District, Moscow Region

anastezuya@mail.ruФедеральный научный центр животноводства – ВИЖ имени академика Л.К. ЭрнстаРоссияFederal Science Center for Animal Husbandry named after Academy Member L. K. Ernst – L. K. Ernst Federal Science Center for Animal HusbandryRussian Federation20211203202134415256Copyright © Кленовицкий П.М., Иолчиев Б.С., Ветох А.Н., 20212021Кленовицкий П.М., Иолчиев Б.С., Ветох А.Н.Klenovitsky P.M., Iolchiev B.S., Vetokh A.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vetpress.ru/jour/article/view/1449

Актуальность и материал исследований. Изучение характеристик ядрышка в клетках различных тканей позволяет оценить интенсивность процессов пролиферации и биосинтеза белка у животных. В интерфазных клетках ядрышкам соответствуют окрашенные азотнокислым серебром аргирофильные зоны (AgNOR). Цель настоящего исследования – определение на основе компьютерного анализа характеристик AgNOR в интерфазных лимфоцитах овец разных генотипов и выбор параметров для функциональной оценки ядрышек. Состояние AgNOR изучали в лимфоцитах периферической крови у гибридных овец четырех генотипов: чистопородные романовские овцы, их гибриды F1 с архаром (группы 1 и 2), гибриды, несущие 3/4 крови романовских овец и 1/4 крови архара (группа 3), и гибриды, имевшие 7/8 крови домашней овцы и 1/8 крови архара (группа 4). Учитывали число аргирофильных зон (AgNOR), их общую площадь (SSNOR), среднюю плотность их окраски (DNOR), средние плотности окраски ядра (DN) и его участка, свободного от AgNOR (DF). Обработку и анализ изображений проводили средствами программы Image Scope 1.0.

Результаты. Среднее значение AgNOR в исследованных группах овец колеблется от 2,64 (1 группа) до 3,50 у гибридов во 2 и 3 группах. По величине SSNOR достоверных различий между группами не выявлено. По DN и DF все гибриды достоверно уступали чистопородным овцам (р < 0,001). По величине DNOR овцы 2 группы достоверно уступали животным остальных групп (р < 0,001). При оценке состояния ядрышкообразующей системы целесообразно учитывать число AgNOR, а также средние оптические плотности DN и DF.

Relevance and research material. The study of the characteristics of the nucleolus in cells of various tissues allows us to assess the intensity of the processes of protein proliferation and biosynthesis in animals. In interphase cells, the nucleoli correspond to argyrophilic zones (AgNOR) stained with silver nitric acid. The purpose of this study is to determine the characteristics of AgNOR in sheep interphase lymphocytes of different genotypes based on computer analysis and to select parameters for functional evaluation of nucleoli. AgNOR status was studied in peripheral blood lymphocytes from hybrid sheep four genotypes: purebred Romanov sheep, and their F1 hybrids with argali (groups 1 and 2), hybrids, bearing 3/4 of Romanov sheep blood and 1/4 blood argali (group 3), and hybrids that had 7/8 of domestic sheep and 1/8 blood argali (group 4). The number of argyrophilic zones (AgNOR), their total area (SSNOR), their average color density (DNOR), and the average color density of the core (DN) and its AgNOR-free area (DF) were taken into account.

Results. Image processing and analysis were performed using the Image Scope 1.0 program. The average AgNOR value in the studied groups of sheep ranges from 2.64 (group 1) to 3.50 in hybrids in groups 2 and 3. There were no significant differences in the value of SSNOR between the groups. In terms of DN and DF, all hybrids were significantly inferior to purebred sheep (р < 0.001). In terms of DNOR, the sheep of group 2 were significantly inferior to the animals of the other groups (р < 0.001). When evaluating the state of the nucleolus-forming system, it is advisable to take into account the AgNOR number, as well as the average optical densities DN and DF.

аргирофильные структурыархаргибридылимфоцитыовцыядрышковые организаторыядроargyrophilic structuresargalihybridslymphocytessheepnucleolar organizersnucleusReferencesДавидьян А.Г., Кошель Е.И., Лаврова О.Б., Демин А.Г., Галкина С.А., Сайфитдинова А.Ф., Гагинская Е.Р. Функциональные особенности ядрышкового организатора в растущих ооцитах неполовозрелых самок птиц. Онтоогенез. 2017;(48):263–269. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_29404363_54891183.pdf (дата обращения: 21.08.2019).Davidyan A.G., Koshel E.I., Lavrova O.B., Demin A.G., Galkina S.A., Sayfitdinova A.F., Gaginskaya E.R. Functional features of the nucleolar organizer in growing oocytes of immature female birds. Ontogenesis. 2017;(48):263–269. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_29404363_54891183.pdf (date accessed: 21.08.2019).Сидельников А.И., Квочко А.Н., Криворучко А.Ю., Шаламова Е.В Изменение параметров ядрышковых организаторов в клетках почечных канальцев после частичной нефрэктомии при использовании для ушивания операционной раны нитей кетгута. Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2016;5(139):143-148.Sidelnikov A.I., Kvochko A.N., Krivoruchko A.Yu., Shalamova E.V. Changes in the parameters of nucleolar organizers in the cells of the renal tubules after partial nephrectomy when using catgut threads for suturing an operating wound. Bulletin of Altai State Agrarian University. 2016;5(139):143-148.Трухачев В.И., Квочко А.Н., Малюкин А.В., Криворучко А.Ю., Некрасова И.И., Скрипкин В.С., Мещеряков Ф.А. Параметры ядрышковых организаторов эритроцитов уток в постнатальном онтогенезе. Цитология. 2016;(3):229-233. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_25676646_83866250.pdf (дата обращения: 21.08.2019).Trukhachev V.I., Kvochko A.N., Malyukin A.V., Krivoruchko A.Yu., Nekrasova I.I., Skripkin V.S., Meshcheryakov F.A. Parameters of nucleolar organizers of duck erythrocytes in postnatal ontogenesis. Cytology. 2016;(3):229-233. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_25676646_83866250.pdf (date accessed: 21.08.2019).Шайхутдинов Б.И., Овчинина Н.Г., Шишкин А.В. Комбинированное исследование ядрышкового организатора и иммунофенотипирования клеток крови с использованием иммунологических микроматриц (биочипов). Здоровье, демография, экология финно-угорских народов. 2016;(2):60-63. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_26583650_49013497.pdf (дата обращения: 21.08.2019).Shaikhutdinov B.I., Ovchinina N.G., Shishkin A.V. A combined study of the nucleolar organizer and immunophenotyping of blood cells using immunological microarrays (biochips). Health, demography, ecology of the Finno-Ugric peoples. 2016;(2):60-63. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_26583650_49013497.pdf (date accessed: 21.08.2019).Боташева В.С., Калоева А.А., Эркенова Л.Д. Характер морфологических изменений при эндемическом зобе. Фундаментальные исследования. 2015;(1-1):36-40. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_23033674_16949899.pdf (дата обращения: 21.08.2019).Botasheva V.S., Kaloeva A.A., Erkenova L.D. The nature of morphological changes in endemic goiter. Basic research. 2015;(1-1):36-40. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_23033674_16949899.pdf (date accessed: 21.08.2019).Кобяков Д.С., Авдалян А.М., Лазарев А.Ф., Лушникова Е.Л., Непомнящих Л.М. Взаимосвязь аргирофильных белков ядрышкообразующих районов в mib-1 позитивных клетках с клинико-морфологическими параметрами и выживаемостью при немелкоклеточном раке легкого. Фундаментальные исследования. 2015;(1):1600-1604.Kobyakov D.S., Avdalyan A.M., Lazarev A.F., Lushnikova E.L., Nepomnyashchikh L.M. Interrelation of argyrophilic proteins of nucleolar-forming regions in mib-1 positive cells with clinical and morphological parameters and survival in non-small cell lung cancer. Basic research. 2015;(1):1600-1604.Кордюкова М.Ю., Ползиков М.А., Шишова К.В., Зацепина О.В. Функциональное значение белка ядрышка SURF6 человека – ключевого белка одноименного семейства эукариот. Доклады Академии Наук. 2014;455(4):471–473. DOI: 10.7868/S0869565214100211.Kordyukova M.Yu., Polzikov M.A., Shishova K.V., Zatsepina O.V. The functional significance of the human nucleolus protein SURF6 is a key protein of the eukaryotic family of the same name. Reports of the Academy of Sciences. 2014;455(4):471–473. DOI: 10.7868/S0869565214100211.Зенит-Журавлева Е.Г., Полковниченко Е.М., Лушникова А.А., Трещалина Е.М., Букаева И.А., Райхлин Н.Т. Нуклеофозмин и нуклеолин: кодирующие гены и экспрессия в различных тканях животных и человека. Молекулярная медицина. 2012;(4):23-31.Zenit-Zhuravleva E.G., Polkovnichenko E.M., Lushnikova A.A., Treschalina E.M., Bukaeva I.A., Raikhlin N.T. Nucleophosmin and nucleolin: coding genes and expression in various tissues of animals and humans. Molecular Medicine. 2012;(4):23-31.Лазарев А.Ф., Кобяков Д.С., Авдалян А.М., Лушникова Е.Л., Непомнящих Л.М., Климачевский А.А. Исследование аргирофильных белков ядрышкообразующих районов и антигена KI-67 при немелкоклеточном раке легкого. Фундаментальные исследования. 2014;(10):523-529.Lazarev A.F., Kobyakov D.S., Avdalyan A.M., Lushnikova E.L., Nepomnyashchikh L.M., Klimachevsky A.A. Study of argyrophilic proteins of nucleolar-forming regions and KI-67 antigen in nonsmall cell lung cancer. Basic research. 2014;(10):523-529.Бугоркова С.А., Щуковская Т.Н., Курылина А.Ф. Ядрышковый аппарат лимфоцитов как индикатор функциональной активности лимфоидных органов при доклинической оценке вакцин. Проблемы особо опасных инфекций. 2015;(2):75-78. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_23699694_93296639.pdf (дата обращения: 21.08.2019).Bugorkova S.A., Shchukovskaya T.N., Kurylina A.F. The nucleolar apparatus of lymphocytes as an indicator of the functional activity of lymphoid organs in the preclinical assessment of vaccines. Problems of especially dangerous infections. 2015;(2):75-78. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_23699694_93296639.pdf (date accessed: 21.08.2019).Жариков А.Ю., Луницын В.Г., Лампатов В.В., Мотин Ю.Г., Талалаева О.С., Елисеев Д.В., Павляшик Г.В. Влияние новых средств из сырья пантовых оленей на биосинтетические процессы в клетках скелетной мускулатуры крыс в условиях длительной физической нагрузки. Биомедицина. 2016;(1):90-94. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_26382946_45202615.pdf (дата обращения: 21.08.2019).Zharikov A.Yu., Lunitsyn V.G., Lampatov V.V., Motin Yu.G., Talalaeva O.S., Eliseev D.V., Pavlyashik G.V. Influence of new drugs from antler deer raw materials on biosynthetic processes in the cells of the skeletal muscles of rats under conditions of prolonged physical activity. Biomedicine. 2016;(1):90-94. URL: https://elibrary.ru/download/elibrary_26382946_45202615.pdf (date accessed: 21.08.2019).Копытко А.С., Квочко А.Н. Оценка белково-синтетической функции у кур кросса COBB 500 для прогнозирования их продуктивности. Вестник АПК Ставрополья. 2014;4(16):107-110.Kopytko A.S., Kvochko A.N. Evaluation of protein-synthetic function in chickens of the COBB 500 cross to predict their productivity. Bulletin of the agro-industrial complex of Stavropol. 2014;4(16):107-110.Медведев И.Н., Амелина И. В. Влияние функциональной активности ядрышкообразующих районов хромосом на фенотипические признаки у человека // Социальная политика и социология. 2011;(10):285-293.Medvedev I.N., Amelina I.V. Influence of functional activity of nucleolar-forming regions of chromosomes on phenotypic traits in humans. Social policy and sociology. 2011;(10):285-293.Howell W., Black D. Controlled silver staining of nucleolus organizer regions with a protective colloidal developer: in a onestep method. Experientia, 1980;(36):1014–1015.Howell W., Black D. Controlled silver staining of nucleolus organizer regions with a protective colloidal developer: in a onestep method. Experientia, 1980;(36):1014–1015.Arslan Atilla, Toyran Kubilay, Serdar Gözütok , Yorulmaz Tarkan C- and NOR stained karyotypes of mole rat, Nannospalax xanthodon (2n = 54) from Kırıkkale, Turkey. Turkish journal biology, 2011;(35):655-661.Arslan Atilla, Toyran Kubilay, Serdar Gözütok , Yorulmaz Tarkan C- and NOR stained karyotypes of mole rat, Nannospalax xanthodon (2n = 54) from Kırıkkale, Turkey. Turkish journal biology, 2011;(35):655-661.Кленовицкий П.М., Б Иолчиев.С., Жилинский М.А., Багиров В.А., Онкорова Н.Т., Гришин В.Н. Анализ ядрышек в интактных лимфоцитах периферической крови разных видов млекопитающих. Достижения науки и техники АПК. 2015;12(29):92-94.Klenovitsky P.M., B. Iolchiev.S., Zhilinsky M.A., Bagirov V.A., Onkorova N.T., Grishin V.N. Analysis of nucleoli in intact peripheral blood lymphocytes of different mammalian species. Achievements of science and technology of the agro-industrial complex. 2015;12(29):92-94.Кленовицкий П.М., Онкорова Н.Т., Иолчиев Б.С., Багиров В.А., Моисейкина Л.Г. Оценка ядрышек в интактных лимфоцитах овец с использованием компьютерного анализа изображений. Теоретические и прикладные проблемы АПК. 2018;(3):42-46. DOI: 10.32935/2221-7312-2018-36-3Klenovitsky P.M., Onkorova N.T., Iolchiev B.S., Bagirov V.A., Moiseykina L.G. Assessment of nucleoli in intact sheep lymphocytes using computerized image analysis. Theoretical and applied problems of the agro-industrial complex. 2018;(3):42-46. DOI: 10.32935/2221-7312-2018-36-3Кленовицкий П.М., Иолчиев Б.С., Багиров В.А., Жилинский М.А., Онкорова Н.Т., Шайдуллин И.Н. Анализ ядрышек в интактных лимфоцитах у домашней козы (Capra hircus L., 1758) и ее гибридов с сибирским козерогом (Capra sibirica L., 1758) и кавказским туром (Capra caucasica Guldenstadt & Pallas, 1783). Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2018;(4):98-103. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=35084417 (дата обращения: 21.08.2019).Klenovitsky P.M., Iolchiev B.S., Bagirov V.A., Zhilinsky M.A., Onkorova N.T., Shaydullin I.N. Analysis of nucleoli in intact lymphocytes of domestic goat (Capra hircus L., 1758) and its hybrids with Siberian ibex (Capra sibirica L., 1758) and Caucasian tur (Capra caucasica Guldenstadt & Pallas, 1783). Veterinary Medicine, Animal Science and Biotechnology. 2018;(4):98-103. URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=35084417 (date of access: 21.08.2019).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.