vetpressАграрная наукаAgrarian science0869-81552686-701XРедакция журнала "Аграрная наука"10.32634/0869-8155-2021-350-6-12-15vetpress-1681Research ArticleВЕТЕРИНАРНАЯ ФАРМАКОЛОГИЯVETERINARY PHARMACOLOGYПрименение метода ПЦР для обнаружения фальсификации овечьего молока козьим молокомApplication of the PCR method to detect the falsification of sheep milk with goat milkЖижинН. А.ZhizhinNikolay A.

115093, г. Москва, ул. Люсиновская, д. 35

35, Lyusinovskaya str., Moscow, 115093

zhizhinmoloko@mail.ruФГАНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт молочной промышленности»РоссияAll-Russian Research Institute of the Dairy IndustryRussian Federation202121072021061215Copyright © Жижин Н.А., 20212021Жижин Н.А.Zhizhin N.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.vetpress.ru/jour/article/view/1681

В статье рассмотрен вариант применения ПЦР-анализа для оценки чистоты видового состава овечьего молока, прошедшего термическую обработку. В ходе проведения работы был изучен генетический материал основных молочных пород коз и овец, представленных на территории России. Для этого в качестве целевого гена был использован 12S рРНК козы и овцы, на основании которого была получена пара праймеров 12SCH-DIR (5'-AAACGTGTTAAAGCACTACATC-3') и 12SCHINV (5'-GTCTTAGCTATAGTGTATCAGCTG CA-3') для козы и 12SM-FW (5'-CTAGAGGAGCCTGTTCTATAATCGATAA-3') и 12SOA-INV (5'-GTCTCCTCTCGTGTGGTTGAGATA-3') для овцы. Полученные праймеры были протестированы на специфичность путем анализа молока различных пород коз (зааненская, тоггенбургская, альпийская и нубийская молочная порода) и овец (цигайская, ассаф и восточно-фризская). В результате исследования бинарных смесей молока овцы и козы было установлено, что применение данной методики ПЦР-анализа позволяет выявлять примеси козьего молока в овечьем на уровне 0,1%. Также показано, что методика применима как к сырому молоку, так и к молоку, прошедшему технологическую обработку.

The article discusses the option of using PCR analysis to assess the purity of the species composition of heat-treated sheep's milk. In the course of the work, the genetic material of the main dairy breeds of goats and sheep represented on the territory of Russia was studied. For this purpose, the 12S rRNA of a goat and a sheep was used as a target gene, on the basis of which a pair of primers 12SCH-DIR (5'-AAACGTGTTAAAGCACTACATC-3 ‘) and 12SCH-INV (5'-GTCTTAGCTATAGTGTATCAGCTG CA-3') for goat and 12SM-FW (5'-CTAGAG-GAGCCTGTTCTATAATCGATAA-3 ‘) and 12SOA-INV (5'-GTCTCCTCTCG TGTGGTTGAGATA-3') for sheep. The resulting primers were tested for specificity by analyzing the milk of various breeds of goats (Saanen, Toggenburg, Alpine and Nubian dairy) and sheep (Tsigai, Assaf and East Friesian). As a result of the study of binary mixtures of sheep and goat milk, it was found that the use of this method of PCR analysis makes it possible to detect impurities of goat's milk in sheep's milk at a level of 0.1%. It has also been shown that the technique is applicable to both raw milk and processed milk.

ПЦРидентификацияовечье молококозье молокоPCRidentificationsheep milkgoat milkReferencesЮрова, Е.А. Разработка современных методов анализа для идентификации молока и молочной продукции / / Молочная река. 2019. № 2 (74)/ С. 22-25.Yurova, E.A. Development of modern methods of analysis for the identification of milk and dairy products // Molochnaya river. 2019. - No. 2 (74) - S. 22-25.Zachar P.M., Soltes R., Kasarda J., Novotny M., Novikmecova, and D. Marcincakova. 2011. Analytical methods for the species identification of milk and milk products. Mljekarstvo 61:199-207.Zachar P.M., Šoltés R., Kasarda J., Novotný M., Novikmecová, and D. Marcinčáková. 2011. Analytical methods for the species identification of milk and milk products. Mljekarstvo 61: 199–207.Mayer H.K. 2005. Milk species identification in cheese varieties using electrophoretic, chromatographic and PCR techniques. Int. Dairy J. 15:595-604.Mayer, H. K. 2005. Milk species identification in cheese varieties using electrophoretic, chromatographic and PCR techniques. Int. Dairy J. 15: 595-604.Ritcher W., Krause I., Graf C., Sperrer I., Schwarza C., Klostermeyer H. (1997). An indirect competitive ELISA for the detection of cows’ milk and caseinate in goat’s and ewes’ milk and cheese using polyclonal antibodies against bovine g-caseins. Zeitschrift f . ur Lebensmittel-Untersuchung und-Forschung, 204, 21-26.Ritcher, W., Krause, I., Graf, C., Sperrer, I., Schwarza, C., & Klostermeyer, H. (1997). An indirect competitive ELISA for the detection of cows ’milk and caseinate in goat’s and ewes’ milk and cheese using polyclonal antibodies against bovine g-caseins. Zeitschrift f. ur Lebensmittel-Untersuchung und-Forschung, 204, 21-26.Molina E., De Frutos M., Ramos M. (2000). Capillary electrophoresis characterization of the casein fraction of cheeses made from cows’, ewes’ and goats’ milks. Journal of DairyResearch, 67, 209-216.Molina, E., De Frutos, M., & Ramos, M. (2000). Capillary electrophoresis characterization of the casein fraction of cheeses made from cows ’, ewes’ and goats ’milks. Journal of DairyResearch, 67, 209-216.Chianese L., Laezza P., Smaldone L. A., Stingo C., Del Giovine L., Addeo F. (1990). Evaluation of bovine milk in the buffalo mozzarella cheese by two-dimensional electrophoresis. Scienza eTecnica Lattiero-Casearia, 41, 315-326.Chianese, L., Laezza, P., Smaldone, L. A., Stingo, C., Del Giovine, L., & Addeo, F. (1990). Evaluation of bovine milk in the buffalo mozzarella cheese by two-dimensional electrophoresis. Scienza eTecnica Lattiero-Casearia, 41, 315-326.Addeo F., Moio L., Chianese C., Stingo C., Resini P., Berner I., Krause I., Di Luccia A., Bocca A. (1990). Use of plasmin to increase the sensitivity of the detection of bovine milk in ovine cheese by gel isoelectric focusing of caseins. Milchwissenschaft, 45, 708-711.Addeo, F., Moio, L., Chianese, C., Stingo, C., Resini, P., Berner, I., Krause, I., Di Luccia, A., & Bocca, A. (1990 ). Use of plasmin to increase the sensitivity of the detection of bovine milk in ovine cheese by gel isoelectric focusing of caseins. Milchwissenschaft, 45, 708-711.Радаева И.А. Современные ДНК-методы в оценке технологического потенциала молочного сырья / И.А. Радаева, Р. Р Вафин, С. Н. Туровская, Е. Е. Илларионова, А. В. Бигаева / / Пищевая промышленность. - 2020. - №5. - С.19-22.Radaeva I.A. Modern DNA methods in assessing the technological potential of milk raw materials / I.A.Radaeva, R.R. Vafin, S.N. Turovskaya, E.E. Illarionova, A.V. Bigaeva // Food Industry. - 2020. - No. 5. - S.19-22.Юрова Е.А. и др. Применение молекулярно-генетических методов анализа для идентификации видовой принадлежности сырьевого состава пищевой продукции. Вестник МГТУ. 2020. Т 23, № 3.Yurova EA et al. Application of molecular genetic methods of analysis to identify the species of the raw material composition of food products. Bulletin of MSTU. 2020.Vol. 23, No. 3.Partis L., Croan D., Guo Z., Clark R., Coldham T, Murby J. (2000). Evaluation of a DNA fingerprinting method for determining the species origin of meats. Meat Science, 54, 369-376.Partis, L., Croan, D., Guo, Z., Clark, R., Coldham, T., & Murby, J. (2000). Evaluation of a DNA fingerprinting method for determining the species origin of meats. Meat Science, 54, 369-376.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.