Preview

Аграрная наука

Расширенный поиск

Лабораторные испытания ОТ-ПЦР тест-системы VetMAX BVDV Screening для обнаружения генома вируса вирусной диареи крупного рогатого скота фирмы ThermoFisher

https://doi.org/10.32634/0869-8155-2020-338-5-28-34

Полный текст:

Аннотация

Актуальность. В настоящее время ВД КРС распространена практически во всех странах мира с интенсивным ведением животноводства. Особая актуальность проблемы заключается в большом экономическом ущербе, который складывается из снижения удоя во время болезни, гибели молодняка от серозной пневмонии, недополучения привесов живой массы у молодняка, потери продуктивности и воспроизводства животных и, как следствие, абортов и мертворождений, рождения нежизнеспособных телят, а также проведения профилактических, карантинных и ликвидационных мероприятий. Важным звеном в недопущении распространения вирусной диареи крупного рогатого скота остается оперативное проведение лабораторных исследований. Одним из самых технологичных методов диагностики является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Методика. Оценку диагностической значимости тест-системы ОТ-ПЦР VetMAX BVDV Screening (Thermo Fisher) проводили по показателям чувствительности, специфичности и прецизионности в условиях повторяемости и воспроизводимости. Для определения повторяемости проводили исследование 5-ти образцов культуры клеток ПТ-80, зараженной эталонным штаммом «Орегон 24» и 7 образцов культуры клеток ПТ-80, зараженной изолятом «Ресса», в десятикратных разведениях от 10–1 до 10-7, одним оператором в трех параллельных исследованиях на одном оборудовании. Для определения воспроизводимости и чувствительности — тех же образцов тремя операторами в разные дни на одном оборудовании. Для определения специфичности проводили исследования 3 образцов, не содержащих вирус вирусной диареи — аденовирус КРС 1 типа, штамм Bovina — 10, вирус ринотрахеита КРС, штамм «Оренбург» и вирус парагриппа, 3 штамм ЗКСМ.

Результаты. После математической обработки результатов постановки ПЦР для оценки воспроизводимости получены следующие результаты: коэффициент вариации (СV) для тест-системы VetMAX BVDV Screening (Thermo Fisher) составлял 1,0–4,0%; коэффициент вариации (CV) при оценке повторяемости — 1–3%. Специфичность тест-систем VetMAX BVDV Screening (Thermo Fisher) составляла 100%. Тест-система VetMAX BVDV Screening (Thermo Fisher) чувствительна в отношении обнаружения генома вируса вирусной диареи КРС. Так, при постановке ПЦР проб изолята «Ресса» в разведении 10–7 значения Сt определились на 38,18–39,24 циклах, эталонного вируса ВД «Орегон 24» в разведении 10–5 — на 37,85–39,45 циклах амплификации.

Об авторах

А. С. Преображенская
ФГБУ ЦНМВЛ МИЛ
Россия

Преображенская Анастасия Сергеевна, научный сотрудник отдела молекулярных исследований

111622, г. Москва, ул. Оранжерейная, д.23



З. С. Девришова
ФГБУ ЦНМВЛ МИЛ
Россия

Девришова Зелиха Султановна, зав. отделом молекулярных исследований

111622, г. Москва, ул. Оранжерейная, д.23



Т. П. Лобова
ФГБУ ЦНМВЛ МИЛ
Россия

Лобова Татьяна Петровна, старший научный сотрудник отдела вирусных болезней животных, кандидат биологических наук

111622, г. Москва, ул. Оранжерейная, д.23



В. В. Михайлова
ФГБУ ЦНМВЛ МИЛ
Россия

Михайлова Вера Владимировна, зав. отделом вирусных болезней животных

111622, г. Москва, ул. Оранжерейная, д.23



А. А. Варенцова
ФГБУ ЦНМВЛ МИЛ
Россия

Варенцова Алиса Алексеевна, начальник отдела координации научно-исследовательских работ, кандидат биологических наук

111622, г. Москва, ул. Оранжерейная, д.23



Э. М. Аминева
ООО «Квадрос-Био»
Россия

Аминева Эльмира Муллагалиевна, руководитель направления «Ветеринария»

127287, г. Москва, Петровско-Разумовский пр., д.29, стр.4



В. А. Гилев
ООО «Квадрос-Био»
Россия

Гилев Владимир Алексеевич, ведущий специалист направления «Ветеринария»

127287, г. Москва, Петровско-Разумовский пр., д.29, стр.4



Список литературы

1. Khodakaram-Tafti A., Farjanikish G.H., Persistent bovine viral diarrhea virus (BVDV) infection in cattle herds. Iran. J Vet Res. Summer. 2017;18(3):154–163.

2. Simmonds P., Becher P., Collett M.S. et al. Family Flaviviridae. In: King A.M.Q., Adams M.J., Carstens E.B., Lefkowitz E.J. (Eds.). Virus Taxonomy: Ninth report of the International Committee on taxonomy of viruses. Elsevier Science. 2011;1003-1020.

3. Ridpath J.F. Bovine viral diarrhea virus. In: Mahy B.W.J., Regenmortel M.H.V. (Eds.). Encyclopedia of virology. Oxford (UK): Elsevier, 2008;374-380.

4. Schirrmeier H., Strebelow G., Depner K., Hoffmann B., Beer M. Genetic and antigenic characterization of an atypical Pestivirus isolate, a putative member of a novel Pestivirus species. J. Gen. Virol. 2004; 85:3647–3652.

5. Котенева С.В., Глотова Т.И., Глотов А.Г., Южаков А.Г. Генетический полиморфизм возбудителя вирусной диареи, выявленного у телят при вспышках респираторных болезней// Ветеринария. 2018;(4):25-31.

6. OIE Terrestrial Manual 2018; Chapter 3.4.7. Bovine viral diarrhoea; p.1075-1096.

7. Pellerin C, Vandenhurk J, Lecomte J, Tijssen P. Identification of a new group of bovine viral diarrhea virus stras associated with severe outbreaks and high mortalities. Virology. 1994. P.260–268.

8. Пчельников А.В. Этиология, возрастная и сезонная динамика вирусных респираторных болезней телят в племенных хозяйствах. 2017.

9. Шулыгин М.И. Выявление возбудителя вирусной диареи КРС с помощью полимеразной цепной реакции и генотипирование изолятов, циркулирующих на территории Российской Федерации. 2004.


Для цитирования:


Преображенская А.С., Девришова З.С., Лобова Т.П., Михайлова В.В., Варенцова А.А., Аминева Э.М., Гилев В.А. Лабораторные испытания ОТ-ПЦР тест-системы VetMAX BVDV Screening для обнаружения генома вируса вирусной диареи крупного рогатого скота фирмы ThermoFisher. Аграрная наука. 2020;(5):28-34. https://doi.org/10.32634/0869-8155-2020-338-5-28-34

For citation:


Preobrazhenskaya A.S., Devrishova Z.S., Lobova T.P., Mikhailova V.V., Varentsova A.A., Amineva E.M., Gilev V.A. Laboratory tests of the VetMAX BVDV Screening RT-PCR test system for detecting the genome of the bovine viral diarrhea virus by ThermoFisher. Agrarian science. 2020;(5):28-34. (In Russ.) https://doi.org/10.32634/0869-8155-2020-338-5-28-34

Просмотров: 199


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0869-8155 (Print)
ISSN 2686-701X (Online)