Сохранность и контроль за жизнеспособностью коллекционных биообразцов возбудителя антракноза льна

Актуальность. Одна из ключевых задач по сбору и поддержанию коллекционных биообразцов возбудителей болезней льна заключается в сохранении исходных биологических свойств для проведения исследований в лабораторных и полевых условиях.

Методы. Объектом исследований служили штаммы возбудителя антракноза льна. Хранение биообразцов возбудителя антракноза в течение 9–12 месяцев, 5, 10 и 15 лет осуществляли в бытовом холодильнике, используя холодильную (температура +5…+8 °С) и морозильную камеру (температура -15…-20 °С), а также комнатные условия (+18…+24 °С). Субстратом для культуры служили сусло-агаровая питательная среда, льносолома и овес.

Результаты. Установлена корреляционная зависимость между жизнеспособностью биообразцов патогена и длительностью хранения в различных температурных режимах. Показано снижение агрессивности и жизнеспособности при хранении биообразцов в комнатных условиях, жизнеспособность остается высокой только в течение 5–8 месяцев, затем происходит изменение вирулентных и культурально-морфологических свойств. Выявлено, что хранить штаммы возбудителя антракноза в течение 5 лет с периодическим пересевом (9–12 месяцев) без потери вирулентности можно в холодильнике при температуре +5 … +8 °С. Корреляция между количеством проросших спор и хранением в течении 10 лет, при температуре +5…+8 °С в бытовом холодильнике составила 0,81. Впервые установлена возможность долговременного хранения биоматериала возбудителя без пересева и утраты вирулентности в морозильной камере при температуре -15…-20 °С в пробирках на сусло-агаровой питательной среде, зернах овса в течение 10 лет. Коэффициент корреляции между количеством проросших спор и хранением в течение 10 лет при низких отрицательных температурах составил 0,33. 

1. Зотова В.С., Пролётова Н.В. Влияние культурального фильтрата штаммов возбудителя антракноза льна (Colletotrichum lini Manns et Bolley) на длину первичных корешков проростков семян льна. Кормопроизводство. 2024; (7): 9–15. EDN BHQZWC

2. Novakovskiy R.O. et al. Data on genetic polymorphism of flax (Linum usitatissimum L.) pathogenic fungi of Fusarium, Colletotrichum, Aureobasidium, Septoria, and Melampsora genera. Data in Brief. 2020; 31: 105710. https://doi.org/10.1016/j.dib.2020.105710

3. Кудрявцева Л.П. Устойчивость сортов — важный элемент интегрированной защиты льна-долгунца от болезней. Аграрный вестник Урала. 2021; (11): 36–44. https://doi.org/10.32417/1997-4868-2021-214-11-36-44

4. Пролётова Н.В., Кудрявцева Л.П. Особенности роста и развития штаммов гриба — возбудителя антракноза льна (Colletotrichum lini) в условиях in vitro. Аграрная наука. 2025; (4): 137–144. https://doi.org/10.32634/0869-8155-2025-393-04-137-144

5. Кудрявцева Л.П. Значимость «Коллекции микроорганизмов — возбудителей болезней льна» в селекционной работе на устойчивость к фузариозному увяданию и ржавчине. Аграрный вестник Урала. 2025; 25(1): 2–9. https://doi.org/10.32417/1997-4868-2025-25-01-2-9

6. Дубовой В., Жемчужина Н., Елизарова С., Горелов П. Государственная коллекция фитопатогенных микроорганизмов ВНИИФ. Аналитика. 2016; (1): 76–78. EDN VOSLVT

7. Похиленко В.Д., Баранов А.М., Детушев К.В. Методы длительного хранения коллекционных культур микроорганизмов и тенденции развития. Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. 2009; (4): 99–121. EDN LAKPFX

8. Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., Осин А.В. Коллекционная деятельность в области использования патогенных микроорганизмов в обеспечении биологической безопасности Российской Федерации. Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2016; (1): 37–46. EDN VRETOT

9. Кучеренко И.В., Масежная Е.С., Дуганова А.Ю Сохранение жизнеспособности и свойств коллекционных культур молочнокислых бактерий при длительном хранении. Сыроделие и маслоделие. 2023; (4): 92–97. https://doi.org/10.21603/2073-4018-2023-4-13

10. Кривушина А.А., Бобырева Т.В., Яковенко Т.В., Николаев Е.В. Методы хранения микроорганизмов-деструкторов в коллекции ФГУП «ВИАМ» (обзор). Авиационные материалы и технологии. 2019; (3): 89–94. EDN ZBFCWQ

11. Комиссаров Н.С., Дьяков М.Ю., Гарибова Л.В. Методы длительного хранения чистых культур макромицетов. Микология и фитопатология. 2023; 57(3): 155–171. https://doi.org/10.31857/S0026364823030054

12. Sakurai K. et al. Gene Mutations in Ganoderma lucidum During Long-Term Preservation by Repeated Subculturing. Biopreservation and Biobanking. 2019; 17(5): 395–400. https://doi.org/10.1089/bio.2018.0149

13. Утепешева А.А. Подбор методов длительного хранения коллекционных штаммов микромицетов и дрожжей. ЭкоБиоТех. 2019; 2(4): 494–498. https://doi.org/10.31163/2618-964X-2019-2-4-494-498

14. Саукова С.Л. Антонова Т.С., Арасланова Н.М., Ивебор М.В. Сохранение штаммов грибов из рода Fusarium, поражающих подсолнечник, в культуре на разных субстратах и температурных режимах. Масличные культуры. 2023; (1): 67–72. https://doi.org/10.25230/2412-608X-2023-1-193-67-72

15. Шмыленко В.А., Бондаренко А.П. Методические подходы к решению проблем сохранения прихотливых микроорганизмов. Дальневосточный журнал инфекционной патологии. 2018; 34: 78–82. EDN UTZCRW

16. Курилова Е.А., Лебедева А.Ю., Богун А.Г. Накопление мутаций в геномах микроорганизмов в процессе длительного хранения и культивирования. Бактериология. 2021; 6(4): 84–93. EDN HCBAQS

17. Важинская И.С., Купцов В.Н., Коломиец Э.И., Новик Г.И., Кантерова А.В. Криоконсервация как эффективный способ хранения фитопатогенных грибов. Известия Национальной академии наук Беларуси. Серия биологических наук. 2011; (4): 57–62. EDN ZRZSW